国产一区二区三区影视,色成年激情久久综合,亚洲人成伊人成综合图片,亚洲欧美综合v

資訊中心NEWS CENTER

在發展中求生存,不斷完善,以良好信譽和科學的管理促進企業迅速發展
資訊中心

首頁-技術文章-釀酒酵母感受態細胞的制備、轉化

釀酒酵母感受態細胞的制備、轉化

發布時間:2023-04-11       點擊次數:517

 釀酒酵母感受態細胞的制備

 
(1)從YPD平板上挑取一個新鮮的釀酒酵母EBY100單克隆至10 ml YPD液體培養基,30℃,250 rpm 培養過夜。
(2)測定過夜培養物的OD600值為3.0~5.0之間。
(3)將10 ml YPD過夜培養物稀釋至OD600值為0.2~0.4。
(4)在28~30℃搖床中繼續培養3~6 hr,使其OD600值達到0.6~1.0。
(5)于室溫1500 g 離心5 min 收集酵母細胞,棄上清。
(6)用10 ml 洗液洗酵母細胞,隨后于室溫1500 g 離心5 min離 心收集細胞,棄上清。
(7)用1 ml TE/LiAc重懸酵母細胞,以每管50 μl 分裝。
 
釀酒酵母細胞的轉化
 
(1)取50 μl 感受態細胞,再加入待轉質粒各2 μl,混勻。
(2)加入500 μl 轉化用溶液(PEG/LiAc,二甲亞砜),彈擊管壁混勻。
(3)30℃水浴1 h,隔15min彈擊管壁混勻。
(4)加入1毫升YPD培養液,30℃搖床培養1小時。
(5)3500 g 離心5 min ,留沉淀,棄上清。
(6)沉淀用150 μl TE重懸,涂相應的SD平板;將平板倒置于30℃培養。

TEL:15216781845

主站蜘蛛池模板: 凤台县| 高邮市| 玉树县| 宝鸡市| 抚松县| 定安县| 两当县| 安宁市| 吉水县| 盘山县| 凤山县| 阿拉尔市| 榆中县| 苍山县| 临武县| 元氏县| 永宁县| 江城| 荣昌县| 德保县| 黎平县| 新巴尔虎右旗| 冕宁县| 常熟市| 丰台区| 黔西| 都江堰市| 鄢陵县| 仲巴县| 达孜县| 阿拉尔市| 泗洪县| 土默特左旗| 普格县| 邹城市| 七台河市| 从化市| 湟中县| 荥经县| 大厂| 宁陕县|