將載有 pUC19 或 pLH2（2.0 kbp λ 噬菌體 DNA Hind III 片段克隆至 pUC19）的 JM109 混合細(xì)菌懸浮液置于瓊脂培養(yǎng)皿中，在 37°C 下培養(yǎng)過(guò)夜。 將培養(yǎng)皿在 4°C 下冷卻30 分鐘，將菌落（直徑大約 1– 2 mm）轉(zhuǎn)印至一片 82 mm 直徑的 Immobilon-Ny+ 圓片膜上，或轉(zhuǎn)印至競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品帶正電的尼龍膜上。 膜上的 DNA 在 254 nm， 60,000 μJoules/cm² 紫外光照射下 交聯(lián)。 然后用 a ³²P 標(biāo)記的 DNA 探針對(duì)膜進(jìn)行雜交，并使用磷屏成像系統(tǒng)顯色。

Immobilon-NC 轉(zhuǎn)印膜

Immobilon-NC 轉(zhuǎn)印膜是一種經(jīng)濟(jì)型選擇，用于核酸和蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)方案。 這種轉(zhuǎn)印膜是 Southern、colony/plaque 以及蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)方案中zui初使用的膜。 NC HATF 所含的混合纖維素酯基質(zhì)，不含在細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)干擾細(xì)胞壁完整性的表面活性劑。 這些膜用于 colony lifts。 NC HAHY 所含的混合纖維素酯基質(zhì)，所帶的表面活性劑能夠增強(qiáng)可濕性以及轉(zhuǎn)印過(guò)程中的處理能力。 兩種膜對(duì)核酸和蛋白質(zhì)都具有高吸附容量。 適用于常規(guī)轉(zhuǎn)印。